贴壁细胞培养

细胞名称：人结直肠腺癌细胞；COLO 205

形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长；悬浮生长（半贴壁细胞）

培养条件：RPMI 1640；10%FBS 

传代方法：1:3传代；2~3天换液1次

冻存条件：细胞冻存液

特征特性：该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性；产生CEA、IL10。

细胞处理方法：

1. 细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输，获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒，然后在超净台中操作。

2. 如细胞生长至70%-80%，将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用，保留6-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后，按要求消化传代。

3. 弃去培养基，用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次，加入适量胰蛋白酶消化（EDTA胰酶），待细胞完全脱壁后加培养基吹打混匀，分瓶培养。

4. 如有细胞脱落，1000rpm，5min离心，将脱落细胞收集，与贴壁细胞一同消化传代。

特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）

1. 我们使用自产培养基及进口血清培养细胞，在您拿回细胞后，如想更换其它品牌培养基，请依照逐次替换的原则，先保留培养瓶中的培养基，多日多次代逐步更换，以减轻对细胞的刺激。

2. 如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系售后。

3. 细胞任何售后问题，均需拍照存档并在2周之内及时联系客服。

相关产品及货号：

高糖DMEM                               12100

细胞冻存液                               24800

PBS                                     P1020

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)              T1300